Provsläppreagens
Provfrisättningsreagens är för molekylära POCT-diagnostiska scenarier.För de två systemen med direkt amplifiering LAMP och direkt amplifiering PCR finns det inget behov av nukleinsyraextraktion.Det råa lysatet av provet kan amplifieras direkt, målgenen kan detekteras exakt, provdetektionstiden kan förkortas ytterligare, vilket perfekt matchar tillämpningskraven för molekylär POCT.Den är lämplig för nasala pinnar, svalgpinnar och andra provtyper.De bearbetade proverna kan användas direkt för fluorescenskvantitativ PCR- eller LAMP-detektion i realtid, och samma resultat som konventionella extraktionsmetoder kan uppnås utan komplicerade nukleinsyraextraktionsoperationer.
Förvaringsförhållanden
Transportera och förvara i rumstemperatur.
Kvalitetskontroll
Funktionell detektion – kvantitativ qPCR: 800 μl provfrisättningsreagenssystemet amplifierades
med 1000 kopior Novel Pseudovirus, ett näsprov, resulterande liknande amplifieringskurvor ochΔCt-värden inom ± 0,5 Ct.
Experimentell procedurres
1. Ta 800 μl provfrisättningsreagens och sprid ut lyslösningen i 1,5 ml provtagningsrör
2. Ta näspinnen eller svalgpinnen med pinnen; Provtagningsprocedur för näspinnen: ta den sterila pinnen och lägg den i näsborrarna, för långsamt till cirka 1,5 cm djup, rotera försiktigt 4 gånger mot nässlemhinnan i mer än 15 sekunder , upprepa sedan samma operation på den andra näshålan med samma pinne. Provtagningsprocedur för halspinne: ta den sterila pinnen och torka försiktigt av svalgmandlarna och bakre svalgväggen 3 gånger.
3.Placera pinnen omedelbart i provtagningsröret.Pinnhuvudet ska roteras och blandas i förvaringslösningen i minst 30 sekunder för att säkerställa att provet elueras helt i provtagningsröret.
4. Inkubation vid rumstemperatur (20~ 25 ℃) i 1 min, beredningen av lysbuffert är avslutad.
5. Både 25 μl system RT-PCR och RT-LAMP var kompatibla med 10 μl mängd malltillsats för detektionsexperiment.
Anteckningar
1. Den minsta mängden prov direkt lysat som motsvarar en enda pinne kan justeras till 400 μl, som kan justeras enligt testbehoven.
2. När provet har bearbetats av provfrigöringsreagenset, rekommenderas att nästa testfas genomförs så snart som möjligt, väntetiden är helst mindre än 1 timme.
3. Provlysatets pH är surt och detektionssystemet måste ha en viss buffert.Den är lämplig för de flesta PCR-, RT-PCR- och LAMP-fluorescensdetektion med pH-buffert, men inte lämplig för LAMP-kolorimetrisk detektion utan buffert.
