Bst 2.0 DNA-polymeras (glycerolfritt, hög densitet)
Bst DNA-polymeras V2 härrör från Bacillus stearothermophilus DNA-polymeras I, som har 5'→3' DNA-polymerasaktivitet och stark kedjeersättningsaktivitet, men ingen 5'→3'-exonukleasaktivitet.Bst DNA Polymerase V2 är idealiskt lämplig för strängförskjutning, isotermisk amplifiering LAMP (loopmedierad isotermisk amplifiering) och snabb sekvensering.Detta Bst DNA-polymeras V2 kan hämma DNA-polymerasaktivitet vid rumstemperatur, så att det kan drivas och reaktionssystemet kan formuleras vid rumstemperatur, vilket förhindrar ospecifik amplifiering och förbättrar reaktionens effektivitet, och denna version kan vara lyofiliserad.Dessutom kan den frigöra sin aktivitet vid förhöjda temperaturer, vilket eliminerar behovet av ett separat aktiveringssteg.
Komponenter
Komponent | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
Bst DNA-polymeras V2 (Glycerolfri) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
10×HC Bst V2-buffert | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
MgSO4 (100 mm) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Ansökningar
1.LAMP isotermisk amplifiering
2.DNA-strängs enkelförskjutningsreaktion
3.Hög GC-gensekvensering
4.DNA-sekvensering av nanogramnivå.
Lagringstillstånd
Transport under 0°C och förvaras vid -25°C~-15°C.
Enhetsdefinition
En enhet definieras som mängden enzym som införlivar 25 nmol dNTP i syraolösligt material på 30 minuter vid 65°C.
LAMPREaktion
Komponenter | 25 μLSystemet |
10×HC Bst V2-buffert | 2,5 μL |
MgSO4 (100 mm) | 1,5 μL |
dNTP (10 mM vardera) | 3,5 μL |
SYTO™ 16 grön (25×)a | 1,0 μL |
Primerblandningb | 6 μL |
Bst DNA-polymeras V2 (glycerolfri) (32 U/uL) | 0,25 μL |
Mall | × μL |
ddH2O | Upp till 25 μL |
Anmärkningar:
1) a.SYTOTM 16 Grön (25×): Enligt experimentella behov kan andra färgämnen användas som substitut;
2) b.Primermix: erhålls genom att blanda 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB och andra volymer.
Reaktion och tillstånd
1 × HC Bst V2-buffert, inkubationstemperaturen är mellan 60°C och 65°C.
Värmeinaktivering
80°C, 20 min.