Alkaliskt fosfatas (ALP)

Alkaliskt fosfatas härrör från en rekombinant E. coli-stam som bär TAB5-genen.Enzymet katalyserar defosforyleringen av 5´- och 3´-ändarna av DNA- och RNA-fosfomonoestrar.Det hydrolyserar också ribos, såväl som deoxiribonukleosidtrifosfater (NTP och dNTP).TAB5 Alkaline Phosphatase verkar på 5' utskjutande, 5' försänkta och trubbiga ändar.Fosfataset kan användas i många molekylärbiologiska tillämpningar, såsom kloning eller märkning av probändar för att avlägsna de fosforylerade ändarna av DNA eller RNA.I kloningsexperiment förhindrar defosforylering det linjäriserade plasmid-DNA från självligering.Det kan också bryta ned oinkorporerade dNTP i PCR-reaktioner för att förbereda en mall för DNA-sekvensering.Enzymet inaktiveras fullständigt och irreversibelt genom upphettning vid 70°C i 5 minuter, vilket gör att borttagning av fosfataset före ligering eller slutmärkning blir onödigt.