Viralt DNA/RNA Extraction Kit
Detta kit är lämpligt för snabb extraktion av viralt DNA/RNA av hög renhet från prover såsom nasofaryngeala pinnprover, miljösvabbar, cellkultursupernatanter och vävnadshomogenat supernatanter.Satsen är baserad på silikamembranreningsteknologi som eliminerar behovet av att använda fenol/kloroform organiska lösningsmedel eller tidskrävande alkoholutfällning för att extrahera viralt DNA/RNA av hög kvalitet.De erhållna nukleinsyrorna är fria från föroreningar och redo att användas i nedströmsexperiment såsom omvänd transkription, PCR, RT-PCR, realtids-PCR, nästa generations sekvensering (NGS) och Northern blot.
Förvaringsförhållanden
Förvara vid 15 ~ 25 ℃ och transportera i rumstemperatur
Komponenter
| Komponenter | 100RXNS |
| Buffert VL | 50 ml |
| Buffert RW | 120 ml |
| RNas-fri ddH2 O | 6 ml |
| FastPure RNA-kolonner | 100 |
| Uppsamlingsrör (2 ml) | 100 |
| RNase-fria uppsamlingsrör (1,5 ml) | 100 |
Buffert VL:Ge en miljö för lysering och bindning.
Buffert RW:Ta bort kvarvarande proteiner och andra föroreningar.
RNas-fri ddH2O:Eluera DNA/RNA från membranet i spinnkolonnen.
FastPure RNA-kolumner:Specifikt adsorbera DNA/RNA.
Uppsamlingsrör 2 ml:Samla upp filtratet.
RNase-fria uppsamlingsrör 1,5 ml:Samla DNA/RNA.
Ansökningar
Nasofaryngeala pinnar, miljöpinnar, cellkultursupernatanter och vävnadshomogenat supernatanter.
Självförberedd Materials
RNase-fria pipettspetsar, 1,5 ml RNas-fria centrifugrör, centrifug, vortexmixer och pipetter.
Experimentprocess
Utför alla följande steg i ett biosäkerhetsskåp.
1. Tillsätt 200 μl av provet till ett RNase-fritt centrifugrör (fyll till med PBS eller 0,9 % NaCl vid otillräckligt prov), tillsätt 500 μl buffert VL, blanda väl genom att vortexa i 15 – 30 sekunder och centrifugera kort för att samla upp blandningen i botten av röret.
2. Placera FastPure RNA-kolonner i ett uppsamlingsrör 2 ml.Överför blandningen från steg 1 till FastPure RNA-kolonner, centrifugera vid 12 000 rpm (13 400 × g) i 1 min och kassera filtratet.
3. Tillsätt 600 μl buffert RW till FastPure RNA-kolonner, centrifugera vid 12 000 rpm (13 400 × g) i 30 sekunder och kassera filtratet.
4. Upprepa steg 3.
5. Centrifugera den tomma kolonnen vid 12 000 rpm (13 400 × g) i 2 min.
6. Överför försiktigt FastPure RNA-kolonner till nya RNase-fria uppsamlingsrör 1,5 ml (medföljer i satsen) och tillsätt 30 – 50 μl RNase-fri ddH2O till mitten av membranet utan att vidröra kolonnen.Låt stå i rumstemperatur i 1 min och centrifugera vid 12 000 rpm (13 400 × g) i 1 min.
7. Kassera FastPure RNA-kolonner.DNA/RNA kan användas direkt för efterföljande analyser, eller lagras vid -30~ -15°C under en kort period eller -85 ~-65°C under en längre period.
Anteckningar
Endast för forskningsanvändning.Ej för användning i diagnostiska procedurer.
1. Utjämna proverna till rumstemperatur i förväg.
2. Virus är mycket smittsamma.Se till att alla nödvändiga säkerhetsåtgärder vidtas innan experimentet.
3. Undvik upprepad frysning och upptining av provet, eftersom detta kan leda till nedbrytning eller minskat utbyte av det extraherade virala DNA/RNA.
4. Självförberedd utrustning inkluderar RNase-fria pipettspetsar, 1,5 ml RNase-fria centrifugrör, centrifug, vortexmixer och pipetter.
5. När du använder kitet, bär en labbrock, engångslatexhandskar och en engångsmask och använd RNase-fria förbrukningsvaror för att minimera risken för RNase-kontamination.
6. Utför alla steg i rumstemperatur om inget annat anges.
Mekanism och arbetsflöde
