Ultra Nuclease GMP-kvalitet
Kat.nr: HC2016A
UltraNuclease GMP-kvalitet uttrycks och renas i Escherichia coli (E.coli) genom genetiskt modifierad och framställd under GMP-miljöer.Det kan minska viskositeten hos cellsupernatanten och cellysatet i vetenskaplig forskning, öka proteinreningseffektiviteten och förbättra proteinfunktionell forskning.Produkten kan också reducera värdnukleinsyrarester till pg-grad, vilket förbättrar prestandan och säkerheten för biologiska produkter av applikationer inklusive virusrening, vaccintillverkning och protein/polysackaridläkemedelstillverkning.Dessutom kan produkten även appliceras för att förhindra sammanklumpning av humana perifera mononukleära blodceller (PBMC) i cellterapi och vaccinutveckling.
UltraNuclease tillhandahålls i form av ett steriliserat reagens, eluerat i buffert (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glycerin), med utseendet av en färglös, transparent vätska.Denna produkt tillverkas enligt GMP-processkrav och tillhandahålls i flytande form.
Komponenter
UltraNuclease GMP-kvalitet (250 U/μL)
Förvaringsförhållanden
Produkten levereras med torris och kan förvaras vid -25℃~-15°C i två år.
Om produkten är öppnad och har förvarats vid 4 ℃ i mer än en vecka, rekommenderar vi filtreringprodukten för att förhindra mikrobiell kontaminering.
Specifikationer
| Uttrycksvärd | Rekombinant E. coli med UltraNuclease-genen |
| Molekylvikt | 26,5 kDa |
| soelektrisk punkt | 6,85 |
| Renhet | ≥99 % (SDS-SIDAN) |
| Förvaringsbuffert | 20 mM Tris-HCl pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glycerin |
|
Enhetsdefinition | Definitionen av en aktivitetsenhet (U) är mängden enzym som används förändra absorptionsvärdet för ΔA260 med 1,0 på 30 minuter i en 2,625 mlreaktionssystem vid 37 ℃ med ett pH på 8,0 (motsvarande fullständig nedbrytning av37 μg laxsperma-DNA till oligonukleotider). |
Instruktioner
1. Prov Samling
Vidhäftande celler: ta bort mediet, tvätta cellerna med PBS och ta bort supernatanten.
Suspensionsceller: samla upp cellerna genom centrifugering, tvätta cellerna med PBS, centrifugera vid 6 000rpm i 10 min, samla upp pelleten.
Escherichia coli: samla in bakterierna genom centrifugering, tvätta en gång med PBS, centrifugera vid 8 000rpm i 5 min, och samla upp pelleten.
2. Provbehandling
Behandla de uppsamlade cellpelletsen med lysbuffert i förhållandet massa(g) till volym(mL)1:(10-20), eller med mekaniska eller kemiska metoder på is eller vid rumstemperatur (1g cellpellet innehåller ca.
109 celler).
3. Enzymbehandling
Tillsätt 1-5 mM MgCl till reaktionssystemet och justera pH till 8-9.
Tillsätt UltraNuclease enligt förhållandet 250 enheter för att smälta 1 g cellpellets, inkubera vid 37 ℃ i mer än 30 minuter.Se formuläret "Rekommenderad reaktionstid" för att väljabehandlingens varaktighet.
4. Supernatant Samling
Centrifugera vid 12 000 rpm i 30 minuter och samla upp supernatanten.
Obs: Om lösningen är sur eller alkalisk, eller innehåller höga koncentrationer av salt, rengöringsmedel ellerdenatureringsmedel, öka enzymdosen eller förläng behandlingstiden i enlighet med detta.
Rekommenderade reaktionsvillkorons
| Parameter | Optimalt skick | Effektivt tillstånd |
| Mg²+Koncentration | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatur | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT-koncentration | 0-100 mM | >0 mM |
| Merkaptoetanol Koncentration | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalent katjonkoncentration | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfat lon Koncentration | 0-10 mM | 0-100 mM |
Rekommenderad Reaktion Tid (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8,0)
| UltraNuclease-mängd (slutlig koncentration) | Reaktionstid |
| 0,25 U/ml | >10 timmar |
| 2,5 U/ml | >4h |
| 25 U/ml | 30 minuter |
Anmärkningar:
Vänligen använd nödvändig personlig skyddsutrustning, såsom labbrock och handskar, för att säkerställa din hälsa och säkerhet!
