Peroxidas (pepparrotskälla) Synonym: Väteperoxidoxidoreduktas;HRP

Pepparrotsperoxidas (HRP) är isolerad från rötterna av pepparrot (Amoracia rusticana) och tillhör ferroprotoporfyringruppen av peroxidaser.HRP kombineras lätt med väteperoxid (H2O2).Det resulterande [HRP-H2O2]-komplexet kan oxidera en mängd olika vätedonatorer:
Donator + H2O2 → Oxiderad donator + 2 H2O
HRP kommer att oxidera olika substrat (se tabell 1):
• Kromogen
• Kemiluminiscerande (som luminol eller isoluminol)
• Fluorogent (som tyramin, homovanillinsyra eller 4-hydroxifenylättiksyra)
HRP är en enkelkedjig polypeptid som innehåller fyra disulfidbryggor.HRP är ett glykoprotein som innehåller 18 % kolhydrater.Kolhydratkompositionen består av galaktos, arabinos, xylos, fukos, mannos, mannosamin och galaktosamin, beroende på det specifika isozymet.

HRP är en allmänt använd märkning för immunglobuliner i många olika immunokemiapplikationer, inklusive immunoblotting, immunhistokemi och ELISA.HRP kan konjugeras till antikroppar med flera olika metoder, inklusive glutaraldehyd, perjodatoxidation, genom disulfidbindningar och även via amino- och tiolriktade tvärbindare.HRP är den mest önskade märkningen för antikroppar, eftersom den är den minsta och mest stabila av de tre mest populära enzymmärkningarna (peroxidas, β-galaktosidas, alkaliskt fosfatas) och dess glykosylering leder till lägre ospecifik bindning.En översikt av glutaraldehyd- och perjodatkonjugationsmetoder har publicerats.

Peroxidas används också för bestämning av glukos4 och peroxider i lösning.Flera publikationer, 6-24 avhandlingar, 25-29 och avhandlingar 30-46 har citerat användning av P8375 i sina forskningsprotokoll.