Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Beskrivning
Kat.nr: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix är ett multiplex kvantitativt PCR-kit baserat på RNA som mall.I experimentet utförs omvänd transkription och kvantitativ PCR i samma reaktionsrör, vilket förenklar den experimentella operationen och minskar risken för kontaminering.Den unika designen av buffert och enzymblandning kan användas i ettstegs lyofiliserat system.Satsen använder värmebeständigt omvänt transkriptas för effektiv syntes av första strängens cDNA med hjälp av hotstart Taq DNA-polymeras för kvantitativ amplifiering.Den innehåller optimerad reaktionsbuffert, enzymblandning etc., och faktorer som effektivt hämmar ospecifik PCR-amplifiering och förbättrar amplifieringseffektiviteten för flera qPCR-reaktioner tillsattes, vilket möjliggör multipel fluorescens kvantitativ amplifiering samtidigt som man säkerställer amplifieringseffektiviteten för primrar.
Komponenter
| namn |
| 1. Lyo-buffert |
| 2. Lyo-enzymblandning |
| 3. Lyo-skyddsmedel |
TransportvillkorJon
S: Lyo-buffert och skyddsmedel: -25~-15 ℃, hållbarhet är 1 år.
B: Lyo-enzymblandning, 2-8 ℃, hållbarhet är 6 månader.
Instruktion för drift
1. Reaktionssystem (ta 25μL som exempel)
| Komponenter | Volym (μL) | Slutlig koncentration |
| Lyo-buffert | 6 | 1* |
| Lyo-enzymblandning | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Primer Mix (10μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Sondmix (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 uM |
| RNA-mall | 5 | - |
| DEPC H2O | Upp till 25 | - |
2. Optimerat cykelprotokoll
1) Standard cykelprotokoll
| Reaktionsstadium | Temperatur | Tid | Cykel | |
| 1 | Omvänd transkription | 50°Ca | 10 minuter | 1 |
| 2 | Initial denaturering | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifieringsreaktion | 95°C | 15 sek | 45 cykler |
| 60°Cb | 30 sekc |
2) Fast Cycling Protocol
|
| Reaktionsstadium | Temperatur | Tid | Cykel |
| 1 | Omvänd transkription | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Initial denaturering | 95°C | 2 sek | 1 |
| 3 | Amplifieringsreaktion | 95°C | 1 sek |
45 cykler |
| 60°Cb | 13 sekc |
Notera:
a) Omvänd transkription: Temperaturen kan väljas mellan 42°C eller 50°C i 10-15 minuter.
b) Amplifieringsreaktion: Temperaturen justeras enligt Tm-värdet för de designade primrarna.
c)Fluorescens signal förvärv: Ställ in den experimentella proceduren enligt kraven iinstrumentmanual.
Teknisk information/specifikationer
| Hot Start | Inbyggd varmstart |
| Detektionsmetod | Primer-probe-detektion |
| PCR-metod | Ett steg RT-qPCR |
| Typ av prov | RNA |
Anteckningar
1. Denna produkt är endast avsedd för forskning.
2. Vänligen använd nödvändig personlig skyddsutrustning, såsom labbrock och handskar, för att säkerställa din hälsa och säkerhet!
