2×PCR Master Mix (utan färgämne)
PCR Master Mix är en sorts konventionell PCR förblandad lösning som är färdig att använda, inklusive Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 och optimerad buffert.Under reaktionen kan endast primern och mallen tillsättas för amplifiering, vilket avsevärt förenklar operationsstegen i experimentet.Denna produkt innehåller utmärkta stabilisatorer och kan lagras i 3 månader vid 4 ℃.PCR-produkten har 3'-dA-utsprång och kan enkelt klonas in i T-vektor.
Förvaringsförhållanden
Produkten ska förvaras vid -25℃~ -15℃ i två år.
Specifikationer
| Trohet (vs. Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Hänga över | 3'-A |
| Polymeras | Taq DNA-polymeras |
| Reaktionsformat | SuperMix eller Master Mix |
| Reaktionshastighet | Standard |
| Produkttyp | PCR Master Mix (2×) |
Instruktioner
1.Reaktionssystem
| Komponenter | Storlek (μL) |
| Mall-DNA | Lämplig |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | Till 50 |
2.Amplifieringsprotokoll
| Cykla steg | Temperatur (°C) | Tid | Cyklar |
| Fördenaturering | 94 ℃ | 5 min | 1 |
| Denaturering | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Glödgning | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Förlängning | 72 ℃ | 30-60 sek/kb | |
| Slutlig förlängning | 72 ℃ | 10 min | 1 |
Anmärkningar:
1) Mallanvändning: 50-200 ng genomiskt DNA;0,1-10 ng plasmid-DNA.
2) Mg2+koncentration: Denna produkt innehåller 3 mM MgCl2 lämplig för de flesta PCR-reaktioner.
3) Glödgningstemperatur: Se det teoretiska Tm-värdet för Primers.Glödgningstemperaturen kan ställas in till 2-5 ℃ lägre än det teoretiska värdet för primern.
4) Förlängningstid: För molekylär identifiering rekommenderas 30 sek/kb.För genkloning, 60sek/kb rekommenderas.
Anteckningar
1.För din säkerhet och hälsa, vänligen bär laboratorierockar och engångshandskar vid användning.
2.Endast för forskning!
